Metodología para la evaluación automatizada de la expresión del receptor de vitamina D mediante técnica inmunocitoquímica / Methodology of automated Vitamin D receptor immunocytochemical expression análisis

Introducción: la citología permite examinar células de un tejido de manera mínimamente invasiva, sin embargo, la capacidad de realizar técnicas complementarias como la inmunocitoquímica (ICQ) no está exenta de dificultades. Es el objetivo de nuestro trabajo presentar una metodología que permita la utilización de ICQ automatizada asociada a un análisis automatizado mediante técnica de patología digital. Métodos: se incluyeron 5 sujetos sanos y se obtuvieron muestras de superficie ocular utilizando un citocepillo. La muestra fue procesada de manera automatizada mediante citología en fase líquida. Posteriormente se realizó ICQ automatizada para detectar la positividad nuclear del receptor de vitamina D. Para la evaluación, se utilizaron dos métodos: cuantificación directa bajo microscopio de luz y análisis automatizado usando analizador de imágenes en las diapositivas digitales obtenidas con un Scanner. El porcentaje de positividad encontrado con ambos métodos fueron comparados utilizando la prueba de Kappa. Resultados: todas las muestras presentaron una celularidad adecuada. En todos los casos fue posible realizar ICQ automatizada, más aún, todas las muestras presentaron una calidad óptima. Al comparar ambos métodos (manual versus automatizado) se observó un nivel de acuerdo sustancial (Kappa=0,69). Conclusiones: la metodología presentada en este manuscrito permite la evaluación automatizada de marcadores inmunohistoquímicos de la superficie ocular de manera mínimamente invasiva, siendo similar al conteo manual, pero más objetivo y reproducible. Esta técnica podría ser útil para el estudio proteómico en patologías como la enfermedad por ojo seco.

Introduction: Cytology tests use small amounts of tissue samples for diagnosis as a minimally invasive technique; however, the ability to perform complementary methods such as immunocytochemistry (ICC) is not without difficulties. The aim of our work is to present a method that allows the use of automated ICC associated with an automated image analysis using digital pathology. Methods: Five healthy subjects were included, and ocular surface samples were obtained using a cytobrush. The sample was processed as liquid-based cytology. Automated ICC was subsequently performed to detect vitamin D receptor nuclear positivity. Two methods were used for evaluation: manual counting under a light microscope and automated analysis using an image analyzer on digitized slides. The percentage of positivity found in both methods was compared using the Kappa test. Results: All samples presented adequate cellularity. In all cases, it was possible to perform automated ICC; moreover, all samples presented optimal quality. When comparing both methods (manual versus automated), a substantial level of agreement was seen (Kappa=0.69). Conclusions. The method presented in this manuscript allows the minimally invasive automated evaluation of ocular surface ICC markers, being like manual counting but more objective and reproducible. This technique could be useful for proteomic study in pathologies such as dry eye disease.

Percepção de mulheres submetidas à mastectomia sobre o apoio social / Perceptions of social support of women submitted to mastectomy / Percepción de mujeres sometidas a mastectomía sufre el apoyo social

O objetivo deste estudo foi compreender a percepção de mulheres submetidas a mastectomia acerca do apoio social recebido quando do enfrentamento do câncer de mama e da cirurgia mastoctômica. O estudo é descritivo de natureza qualitativa e foi realizado com três mulheres residentes no município de Manoel Ribas - PR - que foram submetidas a esse tipo de cirurgia. Os dados foram coletados no mês de maio de 2011, por meio de entrevista semiestruturada, e tratados de acordo com a análise de conteúdo da modalidade temática. Foram evidenciadas duas categorias: 1) "Família, amigos e comunidade: uma complexa rede de suporte social", em que se demonstra a importância do apoio desses grupos para a recuperação da mulher submetida a mastectomia; e 2) Fé e espiritualidade: suporte para o alívio da dor e esperança de reabilitação", categoria que se refere à espiritualidade enquanto alívio nos momentos de estresse relacionado ao tratamento. Os profissionais de saúde constituem uma rede de apoio para a mulher e seus familiares, desempenhando um papel importante tanto no cuidado quanto na recuperação dessas mulheres, oferecendo-lhes suporte psicológico e assistencial.

The aim of this study was to understand the perception of women who underwent mastectomy concerning social support in coping with breast cancer and mastectomy. This is a descriptive-qualitative study, carried out with three women residing in Manoel Ribas-PR, who were submitted to mastectomy. Data were collected in May 2011 through semi-structured interview and treated according to the analysis of thematic content, showing the following categories: "Family, friends and community: a complex network of social support", which demonstrates the importance of support from these groups in the recovery of women with mastectomy, and "Faith and Spirituality: support for the relief of pain and hope of rehabilitation", which refers to spirituality as a relief in times of stress related to treatment. Health professionals should provide a support network for women and their families, playing an important role both in care and on the recovery of these women, offering psychological support and care.

El objetivo de este estudio fue comprender la percepción de mujeres sometidas a mastectomía sobre el apoyo social recibido con relación al enfrentamiento del cáncer de mama y de la cirugía de mastectomía. Este es un estudio descriptivo de naturaleza cualitativa y fue realizado con tres mujeres del pueblo de Manoel Ribas-PR, que fueron sometidas a este tipo de cirugía. Los datos fueron recolectados en mayo de 2011, a través de entrevista semiestructurada y tratados de acuerdo con el análisis de contenido de la modalidad temática. Fueron evidenciadas dos categorías: 1) "Familia, amigos y comunidad: una compleja red de apoyo social", lo que demuestra la importancia del apoyo de estos grupos para la recuperación de la mujer sometida a mastectomía; y 2) "Fe y espiritualidad: apoyo para el alivio del dolor y esperanza de rehabilitación", categoría que se refiere a la espiritualidad como un alivio en momentos de estrés relacionado al tratamiento. Los profesionales de salud constituyen una red de apoyo para la mujer y sus familiares, desempeñando un papel importante tanto en el cuidado como en la recuperación de estas mujeres, ofreciéndoles apoyo psicológico y atención médica.

Suscetibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de infecções do trato urinário de pacientes atendidos no Hospital Universitário Bettina Ferro de Souza, Belém - PA / Antibiotic susceptibility antimicrobial of uropathogens isolated from culture of patients with urinary tract infections from the University Hospital Bettina Ferro de Souza, Belém - PA

As infecções do trato urinário (ITU) são causadas na maioria das vezes por bactérias da microbiota intestinal e os agentes antimicrobianos apresentam um papel importante no tratamento e prevenção destas infecções. Visando conhecer o perfil de suscetibilidade de bactérias causadoras de ITU em pacientes atendidos no Hospital Universitário Bettina Ferro de Souza (HUBFS), foram analisados os resultados de 919 uroculturas. A identificação das bactérias foi realizada por métodos bioquímicos tradicionais e o antibiograma pelo método de disco-difusão. Foram positivas 208(22,6%) uroculturas. Houve maior freqüência de ITU em mulheres (78,9%) e em adultos (47,6%). Escherichia coli (69,8%), Enterobacter sp (7,2%) e Klebsiella sp (5,8%) foram as bactérias Gram-negativas GN mais isoladas. Entre as Gram-positivas-GP, Staphylococcus coagulase negativa-SCN (4,8%) e S. saprophyticus (2,9%) foram as mais prevalentes. As bactérias GN demonstraram elevada resistência aos antibióticos ampicilina (69%), amicacina (67,4%); sulfametaxazol-trimetropina (61,5%) e alta sensibilidade à cefotaxima (92,5%), ceftazidima (89,8%), iprofloxacina (88,8%) e gentamicina (86,1%). Os cocos GP demonstraram boa sensibilidade apenas à oxacilina (90%) e ciprofloxacina (80%), apresentando resistência acimade 50% aos demais antibióticos testados. Os resultados reforçam a necessidade do conhecimento do perfil de suscetibilidade antimicrobiana das bactérias causadoras de ITU, para evitar o uso incorreto de antibióticos.

The major cause of tract infections (UTIs) are bacteria from the intestinal microbiota, and the antibiotic therapy is the mainstay of treatment and prevention of these infections. To establish the profile of bacteria susceptibility in patients with UTI from the University Hospital Bettina Ferro de Souza (HUBFS), 919 urine samples were cultured and assessed their susceptibility, to common antibiotics Uropathogens identification was done by traditional biochemical methods and antibiogram was determined by the disk-diffusion method. 208(22.6%) urine cultures were positive. There was higher UTI frequency in women (78.9%) and adults (47.6%). Escherichia coli (69.8%), Enterobacter sp (7.2%) and Klebsiella sp (5.8%) were the most frequently isolated Gram-negatives (GN) bacteria. Coagulase negative Staphylococcus (CNS) (4.8%) and S. saprophyticus (2.9%) were the most prevalent among the Gram-positive (GP) bacteria. GN bacteria demonstrated high resistance to ampicilin (69%), amicacin (67.4%); sulfametaxazol-trimetropin (61.5%) and high sensibility only for oxacilin (90%) and ciprofloxacin (80%), with resistance higher than the other tested antibiotics. The results sustain the need to establish a better knowledge of the antibiotic susceptibility profile of the bacteria that cause UTIs to avoid the abusive use of antibiotics.

Bactérias isoladas de ponta de cateter venoso central e suscetibilidade antimicrobiana em um Hospital Público de Belém - PA / Isolated bacteria of tip of central veined catheter and antimicrobial susceptibility in a public hospital of Belém - PA

A presença do cateter venoso central (CVC) no organismo aumenta o risco de colonização de microrganismos podendolevar a disseminação microbiana principalmente em internados de Unidade de Terapia Intensiva. O objetivo do trabalho foi determinar os microrganismos mais freqüentes e o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos em ponta de CVC provenientes de pacientesdo Hospital Pronto Socorro Municipal Dr. Humberto Maradei Pereira, Belém-PA, entre janeiro-2003 a dezembro-2004. Foram executadas 61 culturas e antibiogramas de pontas de CVC pelo método semiquantitativo de Maki. A identificação dos agentes e os testes de suscetibilidade seguiram metodologias convencionais e sistema automatizado ATB-Expression. Foram positivas 56(91,8%) culturas com prevalência de Pseudomonas aeruginosa 26,8%, Staphylococcus aureus 21,4% e Staphylococcus coagulase negativa-SCN 16,1%. Os isolados de P. aeruginosa demonstraram maior sensibilidade para Colistina (100%), Fosfomicina (93,3%), Imipinem e Meropenem (80%) tendo resistência acima de 40% aos demais antimicrobianos testados. Foram encontradas cepas oxacilina-resistentes de 41,7% para S. aureus e 11,1% para S. coagulase negativa sendo todas sensíveis à Vancomicina. Isolados de S. aureus e SCN apresentaramsensibilidade acima de 70% à Nitrofurantoína, Vancomicina, Teicoplanina, Minociclina, Quinopristina-Dalfopristina e Ácido Fusídico tendo revelado elevada resistência para Clindamicina, Cotrimoxazol, Penicilina G, Eritromicina, Rifampicina, Norfloxacina e tetraciclina.

The presence of the central veined catheter in human organism increases the risk of colonization of microrganisms mainly in admitted patients the Intensive Care Unit. The objective of this assignment was to determine the most frequent microrganisms and the susceptibility profile to the antimicrobial in tip of veined catheter originating from patients who were admitted in “Hospital Pronto Socorro Municipal Dr. Humberto Maradei Pereira”, Belém – PA, from January 2003 to December 2004. Sixty-one culture and antibiograms of catheter were analyzed to the semi quantitative method of Maki. The agent’s identification and the susceptibility tests followed conventional methodologies and ATB – Expression authorized system. They were positive 56(91.8%) cultures with prevalence of Pseudomonas aeruginosa 26.8%, Staphylococcus aureus 21.4% and Staphylococcus coagulase negative-SCN 16.1% The stumps of P. aeruginosa demonstrated a larger sensibility for Colistin (100%), Fosfomicin (93.3%), Imipenem (80%) and Meropenem (80%), there was a resistance of more than 40% in the other tested antimicrobial. Among the Staphylococcus, there were oxacilin-resistant stumps of 41.7% for S. aureus and 11.1% for Staphylococcus negative coagulase, but all of them were sensitive to vancomicin. The stumps of S. aureus and Staphylococcus negative coagulase presented sensibility above 70% to nitrofurantoin, vancomicin teicoplanin, minociclin, quinopristin-dalfopristin and fusidic acid, which revealed high resistance (above 50%) to clindamicin, cotrimoxazol, penicillin G, eritromicin, rifampicin, norfloxacin and tetraciclin.

Perfil de suscetibilidade à antibióticos de amostras de Pseudomonas aeruginosa isoladas no centro de diagnóstico da Unimed Belém - Pará / Antimicrobials susceptibility of Pseudomonas aeruginosa strains isolated in Unimed-Belém diagnostic center

A freqüência de isolados de P. aeruginosa resistentes a antimicrobianos tem aumentado anualmente. O objetivo desse estudofoi avaliar a suscetibilidade de espécimes de P.aeruginosa isoladas no setor de microbiologia do Centro de Diagnóstico da Unimed - Belém. Foram analisadas 84 isolados de P.aeruginosa, no período de janeiro de 2004 a maio de 2005. O teste de suscetibilidade foi realizado através de automação no Mini Api da bioMerieux, com galeria ATB PSE e teste de Kirby Bauer. Os isolados apresentaram maior sensibilidade a piperacilina/tazobactam/piocianina (80.9%) e colistina (100%) e maior resistência a cotrimoxazol (95%),ampicilina/sulbactam (91.3%) e ticarcilina (81.6%). Os resultados desse estudo sugerem que um aumento na concentração de piperalicina/tazobactam pode ser uma opção para a terapêutica no tratamento de infecções por P.aeruginosa

Providencia alcalifaciens strains translocate from the gastrointestinal tract and are resistant to lytic activity of serum complement.

The ability of Providencia alcalifaciens strains, isolated from patients with diarrhoeal disease, to translocate from the gastrointestinal tract and their resistance to serum complement lytic activity were investigated and compared with previously characterized differential invasive capabilities in HeLa cells. Translocation ability to several extraintestinal sites and resistance to lysis by human serum complement were observed in both highly invasive and non-invasive strains. These characteristics have not been previously described in P. alcalifaciens and their potential role in causing disseminated infections should therefore be considered.

Análise dos fatores de virulência e do potencial patogênico em amostras de providencia alcalifaciens com capacidade de invadir ou näo células cultivadas in vitro / Analysis of the virulence factors and the pathogenic potential of Providencia alcalifaciens strains presenting or not invasive ability to in vitro cultured cells

Providencia alcaffaciens é um enteropatógeno invasor e tem sido isolado) de casos de diarréia em crianças e adultos] em países erre desenvolvimento. Estudos anteriores realizados em nosso laboratório demonstraram que as amostras invasoras eram capazes de aderir a células HeLa. A análise desta interação à microscopia eletrônica de varredura revelou uma discreta projeção de membrana e formação de pedestal nos sítios de aderência bacteriana Entretanto não existem ainda relatos sobre os componentes bacterianos envolvidos na expressão, do fenótipo de aderência) e invasão de P. alcalifacíens Portantoa os objetivos deste estudo foram pesquisar os fatores de virulência relacionados ao fenótipo de aderência e invasão em amostras de P. alcalifacíens, bem como avaliar a presença de outros mecanismos de patogenicidade em amostras invasoras (INV+) e não invasoras (INV; isoladas de casos de diarréia, em São Paulo. Neste trabalho foram analisadas 30 amostras sendo que em I 5 amostras foi confirmada a capacidade de aderir e invadir células HeLa previamente identificada, Todas estas 15 amostras foram também capazes de aderir e invadir células Caco-2 apresentando um padrão de aderência semelhante ao tipo localizada (AL de Escherichia coli enteropatogênica (EPEC', Entretanto ai interação as células Caco-2I ocorreu erre menor freqüência do que a observada em células HeLa. Nas demais amostras, não...(au)

Vulvovaginites por Candida albicans em pacientes ambulatoriais do Hospital Universitário Betina Ferro de Souza / Vulvovaginitis for Candida albicans in ambulatory patients of University Hospital Betina Ferro de Souza

Estudou-se a ocorrência de Candida albicans em 47 pacientes ambulatoriais do Hospital Universitário Betina Ferro Souza que apresentavam sinais clínicos de vulvovaginite, utilizando-se 3 técnicas diferentes de exame laboratorial: microscopia a fresco, bacterioscopia por Gram e cultura. O isolamento foi realizado em ágar Sabouraud com cloranfenicol e a identificação pela presença de tubo germinativo em soro humano após incubação a 35°C por 2 horas. Candida albicans foi isolada em 36,17% dos pacientes, sendo a maior ocorrência em mulheres da faixa etária de 18 a 40 anos. A microscopia a fresco detectou 44,68% de leveduras, sendo que estes achados foram confirmados por cultura positiva para C. albicans em 89,48% dos exames. Entre as leveduras isoladas 84% pertenciam à espécie C. albicans. Foi encontrada associação de C. albicans com outros agentes em 17.02% dos casos, sendo: 10,64% com Gardnerella Vaginalis, 4,25% com Trichomonas vaginalis e 2,13% com G. vaginalis + T. vaginalis.

Sensibilidade à antibióticos de cepas de Pseudomonas aeruginosa isoladas de processos clínicos infecciosos / Antibiotics sensibility to strain of Pseudomonas aeruginosa isolated from infectious clinical processes

A sensibilidade a antibióticos foi avaliada em 37 cepas de Pseudomonas aeruginosa isoladas de materiais biológicos colhidos de processos clínicos infecciosos. As cepas após isolamento em agar eosina azul de metileno (BEM), agar de Brolacin ou CLED, com incubação em estufa bacteriológica a 37°C por 24 horas, foram identificadas e submetidas a teste de sensibilidade a antibióticos por automação, através de aparelho Vitek 60 Systems, utilizando-se tarjetas de identificação de gram-negativos (GNI) e tarjetas de sensibilidade (GNS F e GNS F2). Observou-se alta taxa de sensibilidade (acima de 60%) a vários antibióticos (amicacina, aztreonam, carbenicilina, ceftazidima, ciprofloxacin, gentamicina, imipinem, piperacilin, ticarcilina e tobramicina). A ceftazidima e a Ticarcilina apresentaram os mais altos índices de sensibilidade (ambas 86,49%). A ampicilina, a tetraciclina e o trimetropim/sulfa, além das cefalosporinas: cefazolina e cefalotina- de primeira geração-, cefotetan, cefuroxime-sodium e cefuroxime -axetil-de segunda geração- e a ceftriaxona- de terceira geração- revelaram altos índices de resistência (acima de 75%) frente às cepas testadas. A sensibilidade foi praticamente a mesma em todos os materiais biológicos.